目 录
第一篇 形态学与病理学
第一章 光学显微镜技术
第一节 概说
第二节 各种显微镜的性能和使用
第三节 显微照像技术
第四节 制片技术
第二章 组织化学
第一节 固定与制片
第二节 蛋白质、糖类、脂质及核酸组织化学反应
第三节 酶组织化学
第四节 免疫组织化学
第五节 原位核酸分子杂交
第六节 原位聚合酶链反应及其他原位标记技术
第三章 电子显微镜技术
第一节 超薄切片技术
第二节 扫描电镜标本制备技术
第三节 冷冻复型电镜技术
第四节 电镜细胞化学
第五节 免疫电镜技术
第六节 扫描隧道显微镜标本制备技术
第七节 电镜生物X线微区分析技术
第四章 定量形态学
第一节 研究范围
第二节 基本原理
第三节 样本的采集及制备
第四节 测试工具
第五节 二维图像参数
第六节 体视学参数
第七节 结构成份总量计算
第八节 数值修约和书写表达
第九节 形态计量学参数的应用
第十节 定量细胞化学
第十一节 流式细胞技术
第二篇 细胞生物学
第一章 细胞和器官培养技术
第一节 人和动物组织的原代培养
第二节 培养细胞的传代
第三节 人皮肤成纤维细胞培养
第四节 人外周血淋巴细胞培养
第五节 人羊水细胞培养
第六节 人绒毛膜细胞培养
第七节 培养细胞的冻存与复苏
第八节 器官培养
第九节 细胞杂交技术
第二章 细胞生物学研究技术
第一节 培养细胞增殖动力学分析
第二节 体外细胞系的建立
第三节 放射自显影技术
第四节 缩时电影显微照像术
第五节 培养细胞的显微注射法
第六节 细胞骨架及核骨架技术
第三章 细胞分离技术
第一节 细胞分离的一般技术和注意事项
第二节 液体样品中的细胞分离
第三节 从组织器官分离细胞
第四节 肝脏灌流分离肝细胞
第五节 细胞淘洗法
第六节 细胞电泳分离技术
第四章 细胞通讯研究技术
第一节 前言
第二节 细胞通讯研究方法
第三节 细胞通讯研究方法的应用和实验设计
第三篇 生物化学与生物物理学
第一章 层析技术
第一节 凝胶过滤层析技术
第二节 离子交换层析技术
第三节 亲和层析技术
第四节 吸附层析技术
第二章 电泳技术
第一节 电泳技术的基本原理及电泳类型
第二节 纸电泳和醋酸纤维素薄膜电泳
第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第四节 琼脂糖凝胶电泳
第五节 等电聚焦
第六节 细胞电泳
第七节 毛细管电泳
第八节 Phast系统
第三章 蛋白质分离纯化技术
第一节 利用溶解度差别的分离方法
第二节 利用分子大小不同的分离纯化方法
第三节 根据蛋白质分子带电性质不同的分离方法
第四节 利用蛋白质吸附性质不同的分离方法
第五节 利用蛋白质的特异性配体分离方法—— 亲和层析
第四章 蛋白质分子量测定技术
第一节 离心技术测定大分子物质的分子量
第二节 凝胶过滤层析法测定大分子物质的分子量
第三节 十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定大分子物质的分
子量
第五章 蛋白质定量测定技术
第一节 凯氏定氮法
第二节 双缩脲法
第三节 Folin(福林)-酚试剂法(Lowry法)
第四节 紫外分光光度法
第五节 考马斯亮蓝G-250染色法
第六节 BCA法
第六章 蛋白质序列分析方法
第一节 化学分析法
第二节 测定核苷酸的顺序推断蛋白质的一级结构
第七章 蛋白质折叠、磷酸化、转运和分泌的研究方法
第一节 蛋白质折叠
第二节 蛋白质磷酸化
第三节 蛋白质的转运和分泌
第八章 DNA和RNA的提取
第一节 DNA的提取
第二节 DNA浓度测定
第三节 DNA的纯化
第四节 DNA溶液的浓缩与储存
第五节 细菌基因组DNA的储备
第六节 RNA的提取
第七节 从小量样品中同时提取高分子量DNA和RNA
第九章 酶活力及其动力学常数的测定
第一节 基本概念
第二节 酶活力的测定方法
第三节 同工酶的测活
第四节 Km及Vm的测定
第十章 生物膜研究技术
第一节 细胞膜的分离及某些成份的生化测定
第二节 差示扫描量热技术
第三节 自旋标记顺磁共振波谱技术
第四节 冰冻断裂电子显微镜技术
第五节 荧光偏振技术
第六节 激光拉曼技术
第七节 核磁共振技术
第八节 圆二色性技术
第十一章 自由基研究技术
第一节 生物化学方法
第二节 化学发光法
第三节 自旋捕捉技术
第十二章 细胞外间质成分的实验技术
第一节 蛋白多糖和糖胺多糖
第二节 胶原蛋白
第三节 弹性蛋白
第四节 结构糖蛋白
第四篇 分子生物学
第一章 重组质粒
第一节 质粒DNA的抽提与纯化
第二节 外源DNA片段与质粒载体的重组
第三节 大肠杆菌感受态细胞的制备和重组DNA的转化
第四节 重组质粒DNA克隆的筛选和鉴定
第五节 利用粘粒载体构建基因组DNA文库
第二章 重组噬菌体
第一节λ噬菌体的培养纯化和DNA的提取
第二节 外源DNA与λ噬菌体载体重组
第三节 重组λ噬菌体DNA的体外包装
第四节 重组λ噬菌体DNA克隆的筛选和分析
第五节 单链丝状噬菌体M13.的繁殖及其DNA的制备
第三章 大片段DNA分析技术
第一节 大分子基因组DNA的制备与酶解
第二节 脉冲场梯度凝胶电泳
第四章 人工酵母染色体克隆
第一节 YAC载体
第二节 宿主菌
第三节 YAC文库构建的主要步骤
第四节 YAC克隆的筛选和验证
第五节 YAC文库的贮存
第六节 YAC克隆的应用
第七节 存在问题
第五章 mRNA的纯化和分析
第一节 RNA提取
第二节 mRNA纯化
第三节Northern印迹杂交
第四节 DNA酶S1分析
第五节 RNA酶保护分析
第六节cDNA合成
第七节 mRNA末端分析 -RACE
第八节 转录中止的RNA恢复延伸分析
第六章 cDNA文库的构建
第一节 外源双链cDNA的合成与修饰
第二节 克隆用噬菌体载体
第三节 双链cDNA的分子克隆
第七章cDNA文库的筛选和扩增
第一节cDNA文库的筛选
第二节cDNA文库的扩增
第三节 递减杂交
第八章 寡核苷酸引物及探针的制备
第一节 寡核苷酸探针的设计
第二节 寡核苷酸的合成
第三节 寡核苷酸的纯化与质量鉴定
第四节 寡核苷酸的标记
第九章 DNA聚合酶链反应(PCR)
第一节 基本原理与操作
第二节 未知序列的扩增
第三节 PCR产物直接测序
第四节 PCR体外致突变
第五节 PCR中低效非特异扩增和PCR产物夹带污染的对策
第六节 用少量细胞直接进行聚合酶链反应
第七节 干血样和石蜡包埋组织的PCR方法
第八节 PCR扩增大片段DNA
第十章 DNA限制性内切酶图谱分析
第一节 双酶解法
第二节 DNA一端标记加部分酶解法
第三节 片段杂交法
第四节 DNA复制法
第五节 根据全序列推测法
第六节 双酶解法操作步骤
第七节 DNA一端标记加部分酶解法操作步骤
第八节 片段杂交法操作步骤
第十一章 核酸序列分析
第一节 化学法测定DNA核苷酸序列
第二节 末端终止法测定DNA核苷酸序列
第三节 RNA核苷酸序列测定简介
第十二章 重组DNA转染哺乳类细胞及基因表达产物的检测
第一节 哺乳类基因转移的遗传选择标记
第二节 外源基因导人哺乳类细胞的载体
第三节 外源DNA导入哺乳类细胞的方法
第四节 基因表达产物的检测
第十三章 基因表达调控的研究技术
第一节 核抽提物的制备
第二节 DNA探针的制备
第三节 凝胶阻滞分析
第四节 离体DNaseI足迹分析
第五节 甲基化保护分析
第六节 蛋白质-核酸紫外交联
第七节 应用生物素/链亲和素系统纯化DNA结合蛋白
第八节 滤膜结合法分离蛋白结合的DNA
第九节 编码DNA结合蛋白的cDNA克隆的检测、纯化和鉴定
第十节 Southwestern印迹杂交
第十一节 DNaseI超敏感位点的测定
第十二节 氯霉素乙酰转移酶分析(CAT分析)
第十三节 荧光素酶检测系统
第十四节 转录起始位点的测定
第十五节 体外转录体系
第十四章 转基因动物技术
第一节 原理和方法
第二节 仪器试剂
第三节 实验动物的规格和准备
第四节 操作方法
第五节 转基因动物技术中有关的分子生物学实验方法
第六节 讨论
第五篇 医学遗传学
第一章 细胞遗传学研究技术
第一节 实验室装备及常规技术
第二节 染色体标本制备法
第三节 高分辨染色体分析
第四节 染色体脆位点显示
第五节 姐妹染色单体交换及微核
第六节 去透明带地鼠卵穿透试验和人精子染色体离体检测系统
第七节 建立永久性类淋巴母细胞样细胞系
第八节 间期核研究(性染色质)
第九节 染色体原位杂交
第二章 生化遗传学研究技术
第一节 氨基酸代谢病的筛查
第二节 细菌抑制法测血氨基酸——Guthrie试验
第三节 溶酶体酶活性测定
第四节 粘多糖初筛和35S参人试验
第三章 分子遗传学研究技术
第一节 DNA探针的分离和制备
第二节 Southern印迹杂交
第三节 PCR及相关技术在基因诊断中的应用
第四节 多态性连锁分析
第五节 亲子鉴定和个体识别
第六节 产前诊断与遗传咨询
第四章 遗传毒理学研究技术
第一节 概述
第二节 基因突变的测定
第三节 染色体畸变的检测
第四节 DNA初级损伤的检测
第五节 细胞转化试验
第六节 分子生物学技术在遗传毒理学中的应用