序
前言
绪论
如何使用本指南
第1单元钙调蛋白的纯化
实验1活性测定:钙调蛋白组分的活性测定
实验2组织提取物的制备
实验3粗分级分离
实验4离子交换层析
实验5疏水作用层析
实验6钙调蛋白的鉴定:收率的计算
实验7钙调蛋白的鉴定:电泳
实验8蛋白质的裂解消化
实验9反相高效液相色谱
实验10钙调蛋白的物理分析
实验11钙调蛋白的化学分析
试剂的配制
第2单元Hela细胞转录因子AP-1的纯化
实验1Hela细胞核提取物的制备
实验2SephacryS-300HR凝胶过滤层析
实验3序列特异性DNA亲和层析
实验4DNA酶I足迹分析
实验5凝胶迁移变动分析
实验6肝素-SepharoseCL-2B的制备
试剂的配制
参考文献
第3单元大肠杆菌中过表达重组蛋白的纯化
实验1大肠杆菌细胞的破碎和包涵体的配制
实验2包涵体沉淀的溶解.重折叠和离子交换层析
实验3可溶性提取物的聚乙烯亚胺沉淀和免疫亲和层析
实验4定量测定与制备小结
实验5蛋白质的鉴定
方案补充实验:从过表达细菌提纯
试剂的配制
参考文献
第4单元鼠肝胰岛素受体的溶解与纯化
实验1大鼠肝脏质膜的分离
实验2膜胰岛素受体的溶解
实验3溶解受体的凝集素亲和层析
实验4部分纯化受体的胰岛素亲和层析
实验5胰岛素受体与胰岛素的交联
实验6胰岛素激素的胰岛素受体自磷酸化
实验7胰岛素受体糖基化的分析
试剂的配制
参考文献
附录
附录1pH的测量
附录2缓冲液的配制
附录3电导率的测量
附录4固态硫酸铵法分级分离
附录5蛋白质的SDS-PAGE电泳
附录6蛋白质的过甲酸氧化
附录7用亚氨基二乙酸Sepharose6B分离磷酸肽
附录8蛋白质内序分析用肽段的分离与纯化
附录9推荐读物
技术索引
主题索引