免疫学常用实验技术

第一章　多克隆抗体制备
第一节　动物免疫与采血
一、免疫原
二、佐剂
三、动物选择
四、免疫方法
五、免疫动物采血
六、抗原免疫实例
第二节　抗体纯化
一、盐析法
二、凝胶柱层析
三、应用举例――重组蛋白抗体制备
第三节　抗体保存
第二章　单克隆抗体制备
一、试剂与器材
二、实验流程
三、关键点
四、应用举例
第三章　酶免疫测定技术
一、实验原理
二、试剂与材料
三、基本流程
四、关键点
第四章　放射标记技术
第一节　抗原放射性核素标记
一、氯胺T标记法
二、Iodogen标记法
三、125I标记复合物的分离
第二节　放射免疫分析技术
一、实验原理
二、主要技术条件
第三节　免疫放射分析
第四节　应用举例
一、人卵泡休止素放射免疫分析
二、人卵泡休止素免疫放射分析
三、关键点
第五节　免疫细胞受体放射分析 第五章　免疫细胞化学技术
一、试剂配制
二、器材准备
三、实验基本流程
四、关键点
五、常见问题及解决办法
六、应用举例
第六章　经典抗原抗体反应
第一节　凝集反应
一、直接凝集反应
二、间接凝集反应
第二节　沉淀反应
一、单向免疫扩散试验
二、双向免疫扩散试验
第三节　补体的测定
一、血清补体总活性测定
二、C4溶血活性的测定
第四节　循环免疫复合物（CIC）的测定
第七章　抗原分离、纯化与鉴定
第一节　抗原粗分离
第二节　抗原精制
一、吸附层析
二、离子交换层析
三、凝胶过滤层析
四、亲和层析
五、高效液相色谱法
六、离心法
第三节　抗原性质鉴定
第四节　应用举例
一、离子交换层析分离血清蛋白抗原
二、亲和层析法纯化甲胎蛋白
第八章　免疫印迹
第一节　蛋白质抗原电泳分离
一、样本处理
二、凝胶的选择
三、蛋白标准品的选择
第二节　蛋白质的转膜
一、半干式电转印
二、湿式电转印
第三节　杂交
一、抗体的选择
二、封闭
三、抗体杂交
第四节　检测
一、放射性核素检测
二、辣根过氧化物酶――ECL法
三、碱性磷酸酶法
四、关键点
第五节　应用举例
第九章　免疫沉淀
一、细胞裂解
二、免疫沉淀抗原-抗体复合物
三、抗原-抗体复合物法应用举例
四、三分子复合物法应用举例
第十章　免疫细胞分离
第一节　外周血白细胞分离
一、低渗分离
二、聚蔗糖-泛影葡胺分离法
三、聚乙烯吡咯烷酮硅胶分离法
第二节　单核巨噬细胞分离
一、腹腔巨噬细胞分离
二、脾巨噬细胞分离
三、单核细胞纯化
第三节　T、B淋巴细胞选择性分离
一、E花环分离T细胞
二、尼龙毛分离T细胞
三、B细胞分离
第四节　NK细胞分离
一、Percoll不连续密度梯度分离法
二、磁化细胞分离器分离法
第五节　中性粒细胞分离
一、小量分离法
二、大量分离法
第六节　树突状细胞分离
第十一章　流式细胞仪检测技术
一、实验原理
二、实验应用
三、实验方法
四、应用举例
五、关键点
第十二章　淋巴细胞转化试验
一、试剂配制
二、材料准备
三、基本流程
四、关键点
五、B淋巴细胞增殖实验
第十三章　细胞硅实验技术
第一节　NK细胞活性测定
一、放射性核素释放法
二、乳酸脱氢酶释放法
第二节　细胞毒性T细胞功能测定
第三节　补体依赖性细胞毒试验
第十四章　吞噬功能及溶血空斑？验
一、中性粒细胞吞噬功能测定
二、小鼠巨噬细胞吞噬功能测定
三、人巨噬细胞吞噬功能测定
四、小鼠B细胞溶血空斑形成试验
第十五章　细胞因子活性检测
一、IL-1生物学活性检测
二、IL-2生物学活性检测
三、IL-4生物学活性检测
四、IL-6生物学活性检测
五、IL-8生物学活性检测
六、IL-10生物学活性检测
七、肿瘤坏死因子生物学活性检测
第十六章　免疫细胞凋亡
第一节　细胞形态学观察法
一、普通光学显微镜观察方法
二、荧光显微镜观察方法
第二节　寡核苷酸片段检测法
一、普通琼脂糖凝胶电泳法
二、定量琼脂糖凝胶电泳法
三、ELISA检测法
第三节　流式细胞仪
一、PI单染色法
二、Hoechst　33342/PI双染色法