微囊藻毒素分析检测技术

第一章 水体富营养化与蓝藻水华1
第一节 蓝藻概述1
第二节 水体富营养化2
一、水体富营养化的概念2
二、富营养化的评价标准3
三、富营养化水体的特征4
四、富营养化的产生机理5
五、水体富营养化的危害6
六、水体富营养化与蓝藻水华9
七、富营养化研究的意义与展望10
第三节 蓝藻水华的污染现状10
第四节 蓝藻毒素的种类、结构及毒性机理11
一、蓝藻神经毒素12
二、蓝藻肝毒素13
三、其他毒素15
主要参考文献15
第二章 微囊藻毒素概述17
第一节 微囊藻毒素简介17
一、概述17
二、微囊藻毒素的结构18
三、微囊藻毒素的理化性质19
第二节 微囊藻毒素的产生、分布和变迁21
一、微囊藻毒素的产生机制21
二、微囊藻毒素的分布23
三、微囊藻毒素在水体中的迁移24
第三节 微囊藻毒素和环境因子之间的关系25
一、光照对微囊藻毒素的影响25
二、温度对微囊藻毒素的影响26
三、不同形态氮对微囊藻毒素的影响26
四、不同形态磷对微囊藻毒素的影响26
五、痕量金属对微囊藻毒素的影响27
第四节 微囊藻毒素对水环境的影响27
一、微囊藻毒素对水生细菌的影响27
二、微囊藻毒素对浮游动物的影响27
三、微囊藻毒素对底栖动物的影响28
第五节 微囊藻毒素的污染现状29
一、欧洲水体微囊藻毒素的情况29
二、美洲水体微囊藻毒素的情况30
三、亚洲水体微囊藻毒素的情况30
四、我国淡水水体微囊藻毒素的情况31
第六节 微囊藻毒素的危害和毒性机理32
一、MC.LR对动植物的危害32
二、MC.LR对人类健康的危害33
三、MC的毒性机理33
第七节 微囊藻毒素的稳定性和去除方法34
一、微囊藻毒素的一般稳定性和去除研究34
二、化学方法对微囊藻毒素的分解和去除34
三、生物法对微囊藻毒素的分解和去除37
四、物理方法对微囊藻毒素的去除39
第八节 微囊藻毒素标准制订41
主要参考文献42
第三章 微囊藻毒素的提取分离技术47
第一节 原材料的来源47
一、自然水域蓝藻水华47
二、实验室培养产毒铜绿微囊藻48
第二节 提取方法48
一、细胞破碎48
二、提取方式的选择49
三、提取溶剂的选择50
第三节 分离技术51
一、色谱分离技术51
实例3.1 微囊藻毒素的提取和提纯研究55
实例3.2 大孔吸附树脂分离纯化微囊藻毒素55
实例3.3 薄层色谱法检测蓝藻和天然水中微囊藻毒素56
二、过滤与膜分离技术58
实例3.4 超滤膜去除微囊藻毒素.LR的机理和影响因素研究59
三、超临界流体萃取技术60
实例3.5 超临界流体萃取蓝藻中的微囊藻毒素61
第四节 样品的保存61
第五节 纯度鉴定62
主要参考文献63
第四章 微囊藻毒素的化学分析检测方法65
第一节 样品的采集与前处理65
一、样品采集65
二、样品的前处理68
实例4.1 水样的富集和洗脱71
实例4.2 蓝藻及动物样品的富集和净化71
第二节 高效液相色谱法72
一、液相色谱分析条件的选择72
二、检测器的选择73
三、MC的液相色谱定性定量分析74
实例4.3 水中微囊藻毒素的液相色谱分析75
实例4.4 螺及鱼体内MC的液相色谱分析76
第三节 液相色谱/质谱联用分析法77
一、液相色谱/质谱联用技术概述77
二、MC的液相色谱.质谱联用定性定量分析78
实例4.5 高效液相色谱.质谱联用方法测定背角无齿蚌体内微囊藻毒素79
实例4.6 超高效液相色谱.飞行时间质谱快速检测饮用水及藻类制品中的微囊藻毒素81
实例4.7 水样中MC的LC.MS/MS法检测81
第四节 气相色谱法86
一、气相色谱技术概述86
二、MC的气相色谱法定性定量分析86
实例4.8 用MMPB法分析沉淀物中的MC87
第五节 薄层色谱法88
一、薄层色谱法概述88
二、MC的薄层色谱法分析89
第六节 毛细管电泳法89
一、毛细管电泳法概述89
二、MC的毛细管电泳法分析89
第七节 其他化学分析方法90
一、极谱伏安分析90
二、红外法91
三、核磁共振法92
主要参考文献93
第五章 微囊藻毒素的生物检测方法96
第一节 小鼠法96
第二节 盐水虾法97
实例5.1 藻毒素的盐水虾法分析97
第三节 发光细菌法99
一、原理99
二、发展99
三、检测实例100
实例5.2 水产品中藻毒素的发光细菌法分析100
第四节 其他生物方法103
一、动物法103
二、植物法103
主要参考文献104
第六章 微囊藻毒素的生物化学分析检测方法105
第一节 蛋白磷酸酶抑制分析法105
一、原理与分类105
二、特点105
三、微囊藻毒素的蛋白磷酸酶抑制分析法106
实例6.1 蛋白磷酸酶抑制法——荧光法检测微囊藻毒素的影响因素研究108
第二节 2.甲基.3.甲氧基.4.苯基丁酸法109
一、原理109
二、方法的发展与改进110
三、特点110
四、最新研究进展与应用111
第三节 蛋白磷酸酯酶竞争性结合法112
第四节 组织培养细胞毒性法112
第五节 其他生物化学方法113
主要参考文献113
第七章 微囊藻毒素的分子生物学检测方法115
第一节 全细胞聚合酶链式反应法115
一、聚合酶链式反应的发展115
二、原理116
三、PCR反应体系与反应条件117
四、PCR反应特点120
五、PCR扩增产物分析120
六、微囊藻毒素的全细胞PCR分析法120
实例7.1 微囊藻毒素合成酶基因的PCR检测方法123
第二节 实时定量PCR法125
一、实时定量聚合酶链式反应原理与特点125
二、实时定量PCR研究进展125
三、微囊藻毒素的实时定量PCR检测法129
第三节 生物传感器129
主要参考文献130
第八章 微囊藻毒素的免疫学检测方法133
第一节 酶联免疫吸附分析法133
一、酶联免疫吸附分析法概述133
二、微囊藻毒素.LR完全抗原的制备及鉴定134
三、微囊藻毒素.LR抗体的制备与鉴定137
四、微囊藻毒素.LR高灵敏ELISA检测方法的建立141
五、微囊藻毒素.LR高灵敏ELISA酶免试剂盒的研制143
第二节 胶体金免疫色谱法147
一、胶体金免疫检测技术概述147
二、微囊藻毒素.LR单抗胶体金结合物的制备及鉴定150
三、微囊藻毒素.LR“金标”试纸条的研制及验证153
第三节 微囊藻毒素的放射免疫分析法157
一、基本原理157
二、标记技术158
三、放射免疫分析实验注意事项及常见问题162
四、微囊藻毒素的放射免疫检测164
第四节 微囊藻毒素的时间分辨荧光免疫分析168
一、时间分辨荧光免疫分析介绍168
二、时间分辨荧光免疫分析方法的建立172
三、时间分辨荧光免疫分析的注意事项181
四、微囊藻毒素时间分辨荧光免疫分析的方法182
实例8.1 微囊藻毒素直接竞争时间分辨荧光免疫分析法182
实例8.2 微囊藻毒素间接竞争时间分辨荧光免疫分析法184
第五节 免疫亲和色谱法185
一、原理185
二、特点187
三、分类187
四、亲和吸附剂188
五、亲和色谱的基本操作193
六、免疫亲和色谱柱的工作原理195
七、微囊藻毒素.LR免疫亲和色谱柱的研制196
实例8.3 水中微囊藻毒素.LR的免疫亲和色谱.高效液相法检测199
实例8.4 藻样中微囊藻毒素的免疫亲和色谱.液质联用法检测204
第六节 免疫传感器法209
一、原理、特点与分类209
二、免疫传感器的固定方法211
三、检测步骤213
四、免疫传感器在藻毒素检测中的应用进展214
实例8.5 藻样中微囊藻毒素的免疫传感器检测214
主要参考文献219
第九章 展望222附录225
附录一主要缩略语表225
附录二蓝藻水华照片227