分子生物学实验指导

第一部分基础实验1
实验1质粒的提取1
（Ⅰ）碱法1
（Ⅱ）硅石粉法4
实验2质粒DNA琼脂糖凝胶电泳7
实验3质粒DNA酶切检查10
实验4DNA片段的回收12
(Ⅰ)低熔点琼脂糖法12
(Ⅱ)玻璃奶法14
实验5DNA片段的体外连接16
实验6大肠杆菌感受态细胞的制备和转化18
实验7阳性克隆的筛选及鉴定21
实验8噬菌体的空斑纯化23
实验9噬菌体的制备及效价测定25
实验10λ噬菌体DNA的小量制备28
实验11M13噬菌体DNA的制备30
实验12哺乳动物基因组DNA的制备33
实验13植物DNA的制备36
实验14细菌基因组DNA的制备38
实验15基因组DNA的电泳分析40
实验16PCR扩增DNA中的引物设计(Ⅰ)42
PCR扩增DNA中的引物设计(Ⅱ)46
实验17PCR扩增DNA的基本反应50
实验18动物细胞总RNA的快速提取53
实验19植物细胞总RNA的提取56
实验20细菌总RNA的提取59
实验21总RNA的变性琼脂糖凝胶电泳检测62
实验22探针的制备65
实验23Southern杂交68
实验24Northern杂交72
实验25Western吸印76
第二部分综合性、设计性实验80
实验1克隆并鉴定一个真核单拷贝基因80
实验2溶藻弧菌外膜蛋白基因OmpU的克隆与原核表达81
第三部分研究性实验及实验技术的应用91
实验1DNA导入细胞技术91
实验2DNA的体外转录99
实验3DNA的体外翻译103
实验4DNA的定点突变106
实验5DNA的转录起始点确定110
实验6具启动子活性的DNA序列确定113
实验7启动子与调控蛋白结合实验118
实验8甲基化干扰和足迹实验122
实验9RNA的酶保护实验127
实验10mRNA代表性差异展示技术131
实验11oligo(dT)纤维素色谱法提取poly(A)+RNA134
实验12基因表达序列分析136
实验13DNA改组技术144
实验14蛋白质糖基化及磷酸化研究148
实验15免疫共沉淀153
实验16GST pulldown技术研究蛋白质互相作用156
实验17酵母双杂交系统钓取与某一蛋白互相作用的蛋白159
实验18RNA干扰研究蛋白质功能167
实验19染色质共沉淀技术171
实验20基因敲除实验175
实验21基因敲低实验177
第四部分考研例题及常考的分子生物学实验技术179
参考文献180