生物工程（第三版）

第一章 绪论
一、生物工程（技术）的含义
二、生物工程的发展过程
三、现代生物工程的主要内容
四、现代生物工程与药学
五、现代生物工程的成就及发展前景
第二章 基因工程
第一节 概述
一、基因工程的概念
二、基因工程的诞生与发展
三、基因工程的基本过程
第二节 基因工程的理论基础
一、基因的化学本质
二、蛋白质的生物合成
第三节 基因工程工具酶
一、限制型内切核酸酶
二、T4DNA连接酶
三、DNA聚合酶
四、DNA修饰酶
五、核酸水解酶
第四节 基因克隆载体
一、质粒载体
二、噬菌体载体
三、噬菌体-质粒杂合载体
四、人工染色体载体
第五节 目的基因的制备
一、基因文库的建立与靶基因的分离
二、聚合酶链反应技术
三、人工合成基因
第六节 目的基因与载体DNA的连接
一、黏端连接
二、平端连接
三、TA克隆
第七节 重组基因导入宿主细胞
一、基因导入微生物细胞
二、基因导入动、植物细胞
第八节 重组子的筛选与鉴定
一、根据遗传表型差异筛选
二、根据抗药性筛选
三、根据p-半乳糖酶显色反应筛选
四、根据噬菌斑形成能力筛选
五、根据重组子的结构特征筛选
第九节 目的基因的高效表达
一、大肠杆菌表达系统
二、酵母表达系统
三、昆虫细胞表达载体系统
四、哺乳动物细胞表达系统
第十节 基因工程在医药工业中的应用
一、基因工程激素类药物
二、基因工程细胞因子药物
三、基因工程溶血栓药物
四、基因工程可溶性受体
五、基因工程抗体
六、基因工程在药物筛选中的应用
第十一节 基因工程研究新进展
一、蛋白质工程
二、反义药物
三、RNAi技术
四、基因治疗
五、新生物技术疫苗
六、人类基因组计划与新药研究
第十二节 基因工程在制药工业上的应用实例
实例一大肠杆菌表达L-门冬酰胺酶Ⅱ
实例二毕赤酵母表达入内皮细胞生长抑素
实例三昆虫杆状病毒表达人碱性成纤维细胞生长因子
实例四哺乳动物细胞表达人促红细胞生成素
第三章 动物细胞工程
第一节 概述
一、动物细胞工程的概念和研究内容
二、动物细胞工程的发展历程
三、动物细胞工程制药的发展前景
第二节 动物细胞培养特性、营养和培养用液
一、动物细胞培养的特性
二、动物细胞的营养及培养基
第三节 动物细胞培养技术
一、动物细胞培养的技术基础
二、动物细胞培养技术的概念
三、动物细胞体外培养的阶段
四、动物细胞培养的一般技术
五、培养细胞的测定
六、细胞系（或株）的建立
七、动物细胞种质保存及其运输
八、动物细胞培养的应用领域
第四节 动物细胞融合技术
一、动物细胞融合技术的概念
二、动物细胞融合技术的原理和步骤
三、动物细胞融合的促融因素
四、动物细胞融合及遗传物质转移方式
五、动物细胞融合的影响因素
六、杂种细胞筛选原理及筛选系统
七、动物细胞融合技术的应用
第五节 抗体工程和单克隆抗体技术
一、抗体工程的建立
二、抗体工程的概念和研究内容
三、单克隆抗体技术
四、基因工程抗体
第六节 动物细胞大规模培养技术
一、动物细胞大规模培养技术的概念
二、动物细胞大规模培养的条件
三、动物细胞大规模培养的培养基
四、动物细胞大规模培养的方法
五、动物细胞大规模培养系统的操作方式
六、动物细胞生物反应器
七、动物细胞大规模培养的影响因素和过程监控
第七节 动物细胞工程的应用
一、在临床医学与药物研发中的应用
二、在畜牧业中的应用
第八节 动物细胞工程的研究进展
一、转基因技术
二、细胞核移植与哺乳动物克隆技术
三、干细胞研究
四、组织工程
第九节 动物细胞工程在制药工业上的应用实例
一、利用动物细胞培养大规模生产蛋白质和疫苗
实例一组织纤溶酶原激活剂的生产
实例二抗HBsAg单克隆抗体的生产
实例三哺乳动物细胞系统表达基因工程乙型肝炎病毒疫苗
二、转基因动物生产药物
实例利用大鼠乳腺反应器特异性表达人促红细胞生成素
三、转基因动物作为药物筛选模型
实例HCV5'NCR转基因小鼠模型的建立
第四章 植物细胞工程
第一节 概述
第二节 植物细胞培养的理论基础
一、植物细胞的全能性
二、植物细胞的脱分化和再分化
三、植物激素的调控
第三节 植物细胞工程一般培养技术
一、植物组织培养的概念
二、植物细胞培养的特性
三、植物细胞培养的培养基及配制
四、植物细胞的培养方法
五、细胞突变体筛选技术
六、植物细胞种质保存
第四节 植物原生质体培养技术
一、植物原生质体制备
二、植物原生质体培养
三、原生质体培养的意义
第五节 植物细胞融合技术
一、诱导融合的方法
二、杂合体的鉴别与筛选
第六节 植物细胞大规模培养技术
一、培养基的选择
二、培养方式
三、影响细胞培养因素
第七节 植物转基因技术
一、细胞转化方式
二、植物基因转化的受体系统
三、转入基因的表达和分析
第八节 植物细胞工程在制药工业上的应用实例
一、利用植物细胞培养生产天然药物
实例一人参细胞培养
实例二红豆杉细胞培养
实例三其他细胞培养
实例四利用植物细胞培养进行生物转化
二、转基因植物生产抗体、重组疫苗和多肽类药物
实例一利用转基因植物生产抗体
实例二利用转基因植物生产疫苗
实例三利用转基因植物生产其他生物药物
……
第五章 酶工程
第六章 微生物工程
参考文献