第一篇 基础酶学
第一章 酶学与酶工程 2
第一节 酶工程概述 2
一、酶与酶工程 2
二、酶工程简介 3
第二节 酶的分类、组成、结构特点和作用机制 4
一、酶的分类 4
二、酶的组成和结构特点 5
三、酶的作用机制 6
第三节 酶催化剂的特点 11
一、高效性 11
二、专一性 11
三、可调节性 13
第四节 影响酶活性的因素 14
一、酶活测定方式 14
二、酶联测定法 15
三、酶反应速率 15
四、底物浓度 16
五、酶浓度 16
六、温度 16
七、pH 16
第五节 酶反应动力学和抑制作用 17
一、米-曼氏模式 17
二、Lineweaver-Burk作图 18
三、酶的抑制作用 18
第六节 酶的制备 20
一、酶的来源 20
二、蛋白质表达常见问题及解决方式 21
第七节 蛋白质、酶和重组蛋白的分离纯化 26
一、蛋白质纯化的一般考虑 26
二、蛋白质的粗分离 28
三、蛋白质的大规模分离纯化 32
总结与展望 36
参考文献 36
第二篇 实践酶学
第二章 非水酶学 40
第一节 概述 40
第二节 传统非水酶学中的反应介质 40
一、水-有机溶剂单相系统 40
二、水-有机溶剂两相系统 41
三、含有表面活性剂的乳液或微乳液系统 41
四、微水有机溶剂单相系统 42
五、无溶剂或微溶剂反应系统 42
六、气相反应介质 43
第三节 非水介质中酶的结构与性质 43
一、非水介质中酶的结构 43
二、非水介质中的酶学性质 46
第四节 影响非水介质中酶催化的因素以及调控策略 49
一、有机溶剂 49
二、水 51
三、添加剂 55
四、生物印迹 55
五、化学修饰 55
六、固定化酶 56
七、反应温度 57
八、pH 和离子强度 57
第五节 非水介质中酶催化的应用 57
一、酯的合成 57
二、肽的合成 59
三、高分子的合成与改性 60
四、光学活性化合物的制备 63
第六节 非水酶学的最新研究技术 64
一、非水酶学中的新型反应介质 64
二、非水酶学中的新技术 76
三、寻找和改造耐有机溶剂的酶 83
总结与展望 85
参考文献 85
第三章 酶的化学修饰 91
第一节 化学修饰的方法学 91
一、修饰反应专一性的控制 91
二、修饰程度和修饰部位的测定 93
三、化学修饰结果 94