地骨皮治疗糖尿病药效物质

1概论001
1.1地骨皮具有治疗消渴病的作用001
1.1.1医学古籍描述地骨皮用于治疗消渴病002
1.1.2现代研究证明地骨皮具有降血糖等多重功效003
1.2地骨皮中的药效成分005
1.2.1生物碱类005
1.2.2酰胺类006
1.2.3肽类007
1.2.4黄酮类007
1.2.5蒽醌类008
1.2.6香豆素类009
1.2.7木脂素类009
1.2.8萜类010
1.2.9甾醇与类固醇类010
1.2.10有机酸及其衍生物011
1.3中药发挥降糖作用的药理学机制012
1.3.1促进胰岛素分泌，增加血清胰岛素的含量012
1.3.2增加胰岛素的敏感性，改善胰岛素抵抗013
1.3.3促进外周组织和靶器官对糖的利用015
1.3.4类胰岛素样作用015
1.3.5抑制α-葡萄糖苷酶活性，延缓肠道吸收葡萄糖015
1.3.6抑制醛糖还原酶，抑制蛋白质非酶糖基化016
1.4中药药效物质基础研究方法016
1.4.1系统分离方法结合药效学实验研究017
1.4.2生物活性筛选/化学在线分析技术017
1.4.3中药药效组分指纹图谱018
1.4.4中药配位化学研究018
1.4.5药味与药量加减拆方研究019
1.4.6中药血清药物化学研究019
1.4.7基因芯片技术在中药基因组学研究中的应用019
1.52型糖尿病药物筛选模型020
1.5.1动物模型020
1.5.2细胞水平筛选模型021
1.5.3分子水平筛选模型023
1.5.4高通量筛选025
2地骨皮降糖作用研究028
2.1材料与仪器029
2.1.1实验动物029
2.1.2主要试剂与仪器029
2.1.3试验药物030
2.1.4小鼠饲料031
2.2实验方法031
2.2.1建立IR动物模型031
2.2.2实验动物分组与给药031
2.2.3口服耐糖量测定031
2.2.4血清胰岛素测定方法032
2.2.5血清学指标检测方法032
2.2.6胰岛素敏感指数计算032
2.2.7肝脏组织HE染色032
2.2.8统计学方法033
2.3实验结果034
2.3.1小鼠体重变化034
2.3.2小鼠OGTT实验结果比较034
2.3.3小鼠FBG水平变化035
2.3.4小鼠FINS水平变化035
2.3.5小鼠血脂水平的变化036
2.3.6小鼠胰岛素敏感指数036
2.3.7小鼠肝脏的病理变化037
2.4讨论038
2.4.1高脂喂养加小剂量STZ建立2型糖尿病IR模型038
2.4.2地骨皮对IR小鼠体重的影响038
2.4.3地骨皮对IR小鼠血糖的影响039
2.4.4地骨皮对IR小鼠胰岛素水平的影响039
2.4.5地骨皮对IR小鼠血脂的影响039
2.4.6地骨皮对IR小鼠肝脏脂质沉积的影响039
2.4.7地骨皮对IR小鼠胰岛素抵抗的评估040
3活性介导的地骨皮NF-κB抑制作用成分研究041
3.1材料与仪器042
3.1.1主要试剂与仪器042
3.1.2试验药物043
3.2实验方法043
3.2.1NF-κB靶标生物活性跟踪分离043
3.2.2NMR与MS分析044
3.2.3NF-κB抑制活性试验045
3.2.4数据处理方法045
3.3结果与讨论045
3.3.1NF-κB靶标活性跟踪分离药效物质045
3.3.2化合物结构表征046
3.3.3酚酰胺类化合物对NF-κB体外抑制活性052
4活性介导的地骨皮PPARγ激动作用成分研究056
4.1材料与仪器057
4.1.1主要试剂与仪器057
4.1.2试验药物059
4.2实验方法059
4.2.1PPARγ靶标生物活性跟踪分离059
4.2.2NMR与MS分析059
4.2.3PPARγ体外活性试验060
4.2.4数据处理方法061
4.3结果与讨论061
4.3.1PPARγ激动作用部位与成分061
4.3.2脂肪酸是地骨皮激活PPARγ的主要成分062
4.3.3地骨皮中有机酸的PPARγ激活作用063
4.3.4棕榈酸浓度与PPARγ的激活作用的相关性064
4.3.5棕榈酸对PPARγ的激动作用具有配体依赖性065
5地骨皮及其酚酰胺类与脂肪酸的降糖机制研究066
5.1材料与仪器067
5.1.1实验动物067
5.1.2主要仪器与试剂068
5.1.3实时PCR引物069
5.2实验方法069
5.2.1蛋白免疫印迹法实验069
5.2.2实时-PCR实验073
5.2.3统计学方法074
5.3实验结果074
5.3.1小鼠肝脏AMPK与p-AMPK蛋白表达水平变化074
5.3.2小鼠肝脏AMPKα1和AMPKα2基因转录水平变化075
5.3.3小鼠肝脏Akt与p-Akt蛋白表达水平变化075
5.3.4小鼠肝脏与骨骼肌NF-κB蛋白表达水平变化077
5.3.5小鼠肝脏与骨骼肌PPARγ蛋白表达水平变化077
5.3.6小鼠骨骼肌AS160与p-AS160蛋白表达水平变化078
5.3.7小鼠骨骼肌GLUT4基因转录水平变化078
5.4讨论080
5.4.1AMPK蛋白表达与活性对改善IR的影响080
5.4.2AMPKα1与AMPKα2亚基基因表达对改善IR的影响081
5.4.3PI3K/Akt信号通路与胰岛素抵抗的关系082
5.4.4NF-κB信号通路与胰岛素抵抗的关系083
5.4.5PPARγ信号通路与胰岛素抵抗的关系084
5.4.6地骨皮及其化合物对小鼠骨骼肌IR信号通路的作用机制085
6结论与展望087
参考文献090
附录102
S1.化合物1的1H NMR(500MHz，CD3OD)谱102
S2.化合物1的13C NMR(125MHz，CD3OD)谱103
S3.化合物1的HSQC谱103
S4.化合物1的HMBC谱104
S5.化合物1的1H NMR(400MHz，DMSO-d6)谱104
S6.化合物2的13C NMR(100MHz，DMSO-d6)谱105
S7.化合物3的1H NMR(500MHz，CD3OD)谱105
S8.化合物3的13C NMR(125MHz，CD3OD)谱106
S9.化合物3的HSQC谱106
S10.化合物3的HMBC谱107
S11.化合物4的1H NMR(500MHz，CD3OD)谱107
S12.化合物4的13C NMR(125MHz，CD3OD)谱108
S13.化合物4的HSQC谱108
S14.化合物4的HMBC谱109
S15.化合物5的1H NMR(400MHz，CD3OD)谱109
S16.化合物5的13C NMR(100MHz，CD3OD)谱110
S17.化合物5的HSQC谱110
S18.化合物5的HMBC谱111
S19.化合物6的1H NMR(400MHz，CD3OD)谱111
S20.化合物6的13C NMR(100MHz，CD3OD)谱112
S21.化合物6的HSQC谱112
S22.化合物6的HMBC谱113
S23.化合物7的1H NMR(400MHz，CD3OD)谱113
S24.化合物7的13C NMR(100MHz，CD3OD)谱114
S25.化合物7的HSQC谱114
S26.化合物7的HMBC谱115
S27.化合物8的1H NMR(400MHz，CD3OD)谱115
S28.化合物8的13C NMR(100MHz，CD3OD)谱116
S29.化合物9的1H NMR(400MHz，CD3OD)谱116
S30.化合物9的13C NMR(100MHz，CD3OD)谱117
S31.化合物9的HSQC谱117
S32.化合物9的HMBC谱118
S33.富含棕榈酸馏分的1H NMR(500MHz，CD3OD)谱118
S34.富含棕榈酸馏分的13C NMR(125MHz，CD3OD)谱119
S35.富含棕榈酸馏分的HSQC谱119
S36.富含棕榈酸馏分的HMBC谱120