医学免疫学实验

第 1章　抗体制备技术 1
实验一　多克隆抗体的制备 .1
一、抗体制备的流程 .1
二、兔抗人全血清的多克隆抗体制备 .3
三、兔抗羊红细胞的多克隆抗体制备 .5
实验二　单克隆抗体的制备 .6
实验三　抗体的纯化与保存 .11
一、特异性抗体的纯化 .11
二、 IgG的纯化 .11
三、 IgM的纯化 .15
四、 SDS-PAGE法检测免疫球蛋白纯度 .16
五、抗体的保存 .17
第 2章　抗原抗体反应 18
实验四　凝集反应 .18
一、 ABO血型的鉴定（玻片法） .18
二、 SPA协同凝集试验——颗粒性抗原的检测 .20
三、间接凝集抑制试验——妊娠检验 .22
四、间接血凝试验 .22
五、反向间接血凝试验 .24
实验五　免疫沉淀反应 .25
一、双向免疫扩散 .25
二、单向免疫扩散 .26
三、环状沉淀试验——血迹鉴定 28
四、琼脂凝胶对流免疫电泳 29
五、火箭免疫电泳试验 .30
六、免疫浊度测定 .32
实验六　补体结合试验 .33
实验七　免疫印迹技术 .35


VI　医学免疫学实验
第 3章　免疫标记技术 39
实验八　酶免疫技术 39
一、酶联免疫吸附试验 .39
二、酶免疫组织化学技术 42
实验九　荧光免疫技术 .43
一、直接免疫荧光法——检测 B细胞膜表面免疫球蛋白 .43
二、间接免疫荧光法——检测痢疾杆菌 .44
实验十　生物素 -亲和素技术 .46
第 4章　免疫细胞检测技术 48
实验十一　人外周血单个核细胞分离及观察 .48
实验十二　 T细胞功能检测 49
一、 T淋巴细胞转化试验 49
二、 E花环形成试验 51
三、流式细胞术检测法 .52
四、 CTL介导的细胞毒试验 .53
实验十三　 B细胞功能检测——溶血空斑试验 55
实验十四　固有免疫细胞功能检测 .56
一、炎症模型建立及细胞吞噬现象观察 .56
二、 NK细胞介导的细胞毒试验 .58
第 5章　细胞因子及其受体的检测 60
实验十五　白细胞介素 -1的检测 60
实验十六　白细胞介素 -2的检测 62
实验十七　白细胞介素 -2受体的检测 63
一、可溶性白细胞介素 -2受体的检测 .64
二、膜结合型白细胞介素 -2受体阳性细胞检测 65
实验十八　肿瘤坏死因子的检测 .66
一、肿瘤坏死因子的含量检测 66
二、肿瘤坏死因子的活性检测 67
第 6章　 HLA分型技术 . 69
实验十九　补体介导的细胞毒试验 .70
实验二十　混合淋巴细胞培养 .71
实验二十一　 PCR-SSP检测 HLA-B27 .72
实验二十二　 HLA基因分型——限制性片段长度多态性法 73
第 7章　免疫 PCR技术 76
实验二十三　免疫 PCR法检测人肿瘤坏死因子 76


第 8章　超敏反应的检测 79
实验二十四　豚鼠过敏试验 .79
实验二十五　青霉素过敏试验 .80
实验二十六　血清 IgE测定 .81
一、血清总 IgE测定 .82
二、特异性 IgE测定 .83
实验二十七　自身抗体检测 .83
一、抗核抗体检测 .84
二、抗胰岛素抗体检测 .85
实验二十八　循环免疫复合物检测 .86
一、 PEG沉淀法检测循环免疫复合物 86
二、含甲状腺球蛋白免疫复合物的测定 .87
实验二十九　类风湿因子的检测 .88
一、胶乳凝集试验测定类风湿因子 88
二、 ELISA法测定类风湿因子 89
实验三十　结核菌素试验 .90
实验三十一　植物血凝素皮肤试验 .91
附录 93
附录 Ⅰ　试剂的浓度 .93
附录 Ⅱ　常用免疫学检验正常值 .94
附录 Ⅲ　常用实验动物技术 .96
附录 Ⅳ　免疫学实验常用仪器 .99
附录 Ⅴ　免疫学常用试剂的配制 .103
附录 Ⅵ　实验室规则 .106
附录Ⅶ　医学免疫学实验报告册 .107

参考文献 …122