生物化学与分子生物学实验指导

目录
**篇 生物化学与分子生物学实验基本要求
**章 实验室安全规则 1
**节 实验规则 1
第二节 实验室安全和注意事项 2
第三节 应急处理 2
第二章 实验设计与实验报告 4
**节 实验设计 4
第二节 实验记录及实验报告 5
第三节 实验误差 6
第四节 有效数字 8
第三章 实验化学试剂 9
第四章 实验室的基本操作 13
**节 玻璃器皿的洗涤 13
第二节 溶液的常规操作 16
第三节 实验常用标本的制备 17
第四节 常用实验器材的使用 20
第二篇 实验室常用基本技术
第五章 离心技术 24
第六章 分光光度技术 28
第七章 层析技术 32
**节 吸附层析 32
第二节 分配层析 33
第三节 离子交换层析 33
第四节 凝胶过滤层析 34
第五节 亲和层析 35
第八章 电泳技术 38
**节 概述 38
第二节 醋酸纤维素薄膜电泳 40
第三节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 42
第四节 琼脂糖凝胶电泳 44
第五节 其他电泳 46
第六节 电泳后大分子的检测 47
第九章 聚合酶链式反应（PCR） 50
**节 一般聚合酶链式反应 50
第二节 反转录PCR 52
第三节 实时荧光定量PCR 53
第四节 原位PCR 55
第五节 PCR扩增产物分析 56
第十章 生物大分子的制备 58
**节 生物大分子制备的前处理 58
第二节 生物大分子的提取 60
第三节 生物大分子的分离和纯化 61
第四节 冷冻干燥 63
第十一章 AC9000型电解质分析仪使用 66
第十二章 DS-3C微量元素检测仪的使用 70
**节 概述 70
第二节 DS-3C微量元素检测仪的使用 70
第十三章 Bio-Rad分子成像系统 79
**节 Image Lab操作手册 79
第二节 免染总蛋白技术操作和分析指南 88
第三篇 生物化学与分子生物学实验项目
第十四章 蛋白定量测定 91
**节 酚试剂法（改良Lowry） 91
第二节 紫外分光光度法 93
第三节 改良微量凯氏定氮法 94
第四节 考马斯亮蓝法 95
第五节 双缩脲法 97
第十五章 蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 99
第十六章 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 103
第十七章 凝胶层析法测定蛋白质分子量 108
第十八章 乳酸脱氢酶同工酶测定 111
第十九章 影响酶促反应速率的因素 113
**节 pH和温度对酶促反应的影响 113
第二节 激活剂和抑制剂对酶促反应的影响 114
第二十章 碱性磷酸酶米氏常数的测定 117
第二十一章 血清/尿淀粉酶测定 121
**节 改良Winslow氏法 121
第二节 碘-淀粉比色法 122
第二十二章 血糖测定 124
**节 邻甲苯胺法 124
第二节 葡萄糖氧化酶法 125
第三节 尿糖的定性测定（班氏试剂法） 127
第二十三章 血脂测定 129
**节 总胆固醇测定 129
第二节 甘油三酯测定 132
第三节 高密度脂蛋白测定（磷钨酸-镁沉淀法） 136
第四节 血清载脂蛋白的测定 137
第二十四章 超速离心法分离血浆脂蛋白 139
第二十五章 肝/尿中酮体的测定 141
**节 肝中酮体的测定 141
第二节 尿中酮体的定性测定（Lange法） 142
第二十六章 血清氨基转移酶测定 145
**节 血清谷丙转氨酶测定 145
第二节 血清谷草转氨酶测定（赖氏法） 150
第二十七章 血清尿素氮测定 153
**节 二乙酰-肟法 153
第二节 脲酶-比色法 154
第三节 酶偶联速率法测定血清尿素 155
第二十八章 血清胆红素测定 157
**节 改良J-G法 157
第二节 胆红素氧化酶法 159
第二十九章 提取基因组DNA（蛋白酶K消化法） 162
第三十章 提取人外周血基因组DNA 165
**节 改良碘化钾法 165
第二节 SDS裂解法 166
第三十一章 PCR扩增血液胆固醇酯转运蛋白D442G 168
第三十二章 DNA的琼脂糖凝胶电泳 170
第三十三章 快速质粒抽提及酶切鉴定 173
选择题参考答案 176
参考文献 178