《不同能量状态下运动诱导肌源性IL-6表达的机制研究》目的:IL-6是一种多效的细胞因子,运动时IL-6主要来源于骨骼肌。本研究以体外培养的C2C12小鼠骨骼肌成肌细胞为模型,观察糖剥夺(Glucosedeprivation,GD)对肌源性IL-6基因表达和蛋白水平的影响,探讨糖剥夺状态下诱导肌源性IL-6表达的信号调控机制。方法:(1)培养C2C12细胞,诱导分化为成熟的肌管细胞。(2)以含葡萄糖4.5g/L(对照GC组)和不含葡萄糖(糖剥夺GD组)培养基处理细胞0、6、12、18、24小时,分别采用Real-Time PCR和双抗夹心ELISA方法测定细胞IL-6mRNA和培养基中IL-6蛋白水平。(3)GD状态下,分别加入ROS清除剂(NAC)、p38MAPK抑带剂(SB203580)和NF-KB抑制剂(NF-KB Activation Inhibitor)阻断与IL-6表达有关的信号通路,ELISA检测24小时后IL-6蛋白水平。结果: (1)GD组所有时间点IL-6mRNA表达均高于GC组,其中在18和24小时差异具有显著性(p<><><><><>0.05)。结论:(1)体外培养C2C12小鼠骨骼肌成肌细胞诱导分化模型成功建立,可用于糖剥夺对IL-6表达影响及其调控机制研究。(2)正常培养的C2C12细胞存在IL-6基因表达和蛋白释放现象,糖剥夺可增强IL-6基因表达和蛋白释放。(3)糖剥夺诱导的肌源性IL-6表达是多条信号通路共同作用的结果,ROS和p38MAPK信号通路在糖剥夺诱导肌源性IL-6表达的信号调控过程中起到主要作用。(4)NF-KB信号通路在糖剥夺诱导的肌源性IL-6表达的信号调控过程中不起主要作用。