MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约为22nt小分子RNA,其在多种生物学进程中发挥重要作用。乳腺细胞或乳腺的组织培养物是研究乳腺生理学功能的良好模型,并同样有助于miRNA功能的研究,所以对本研究室构建的DBMEC中microRNA进行分析与鉴定,将是所有研究的基础。首先,使用TRIzol法和聚丙烯酰胺凝胶电泳提取并分离DBMEC中的miRNA,随后,分离的小分子RNA经过扩增后开始测序。通过茎环结构及PCR验证试验确定新的NovelmiRNAs的存在。为了确定新miRNA在不同组织间的分布,本研究通过茎环RT-PCR和PCR产物测序方法检测了泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺、肝脏、脂肪组织、脾脏、回肠及肾脏中新miRNA的表达。通过生物学分析,solexa测序共获得12323451个reads,其中有效reads11979706个,9428122个reads属于miRNAs。后续分析表明bta-mir-184表达丰度高,388个定位于典型茎环结构的小分子能够匹配到已知的miRNA茎环中,同时,38个定位于新茎环结构的miRNA被确定为是新的miRNA。新miRNA中的一种,bta-U21在泌乳中期奶牛中是乳腺特有的,7个新miRNA,包括bta-U21在内,表现出组织分布的局限性。《奶牛乳腺microRNA研究进展》正式基于奶牛乳腺microRNA研究基础,将这些研究汇总,并进行梳理总结,形成奶牛乳腺microRNA的前沿内容。以便研究人员了解和参考使用。