基础生物化学实验原理与方法

目录
上篇 原理
第一章 绪论 2
第二章 常用生物材料及其保存技术原理 4
第一节 生物化学实验常用生物材料 4
第二节 材料的取样与保存技术原理 6
第三章 生物分子提取的一般原则 7
第一节 组织细胞的破碎方法 8
第二节 生物小分子的提取 9
第三节 生物大分子的提取 11
第四章 分离纯化技术和生物化学检测技术 16
第一节 沉淀技术 16
第二节 离心技术 21
第三节 层析技术 24
第四节 电泳技术 33
第五节 生物化学检测方法 38
第六节 生物化学实验中的计算机辅助设计 52
下篇 方法
第五章 蛋白质 56
实验一 植物组织中氨基酸总量的测定—— 茚三酮溶液显色法 56
实验二 氨基酸的纸层析 59
实验三 谷物种子中赖氨酸含量的测定 64
实验四 脯氨酸含量的测定 66
实验五 蛋白质的盐析与透析 68
实验六 蛋白质含量的测定方法 69
实验七 蛋白质的两性反应和等电点的测定 85
实验八 等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点 88
实验九 对流免疫电泳 92
实验十 单向定量免疫电泳 95
实验十一 双向免疫扩散 97
实验十二 免疫印迹 98
第六章 酶及维生素 103
实验十三 酶的高效性及特异性 103
实验十四 环境条件对酶促反应的影响 106
实验十五 淀粉酶活性测定 109
实验十六 脂肪酶活性测定 112
实验十七 过氧化氢酶活性测定 114
实验十八 硝酸还原酶活性测定 116
实验十九 氮蓝四唑法测定超氧化物歧化酶活性 120
实验二十 米氏常数的测定 122
实验二十一 苯丙氨酸解氨酶的提取、初步纯化及活性测定 126
实验二十二 亲和层析纯化胰蛋白酶 129
实验二十三 植物过氧化物酶同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳 136
实验二十四 琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶及乳酸脱氢酶总活性测定 143
实验二十五 还原型维生素C含量的测定 147
实验二十六 总维生素C 含量的测定 150
第七章 核酸 153
实验二十七 CTAB 法提取植物总DNA 153
实验二十八 SDS-苯酚法提取动物总DNA 157
实验二十九 质粒DNA 的制备与纯化 160
实验三十 酵母RNA 的分离及组分鉴定(浓盐法) 164
实验三十一 核苷酸分析 167
实验三十二 醋酸纤维素薄膜电泳分离核苷酸 170
实验三十三 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 173
实验三十四 植物总mRNA 的提取 177
实验三十五 PCR 技术扩增DNA 179
实验三十六 Southern 印迹 181
第八章 糖类 186
实验三十七 还原糖和总糖含量的测定(3，5-二硝基水杨酸比色法) 186
实验三十八 可溶性糖的硅胶G 薄层层析 189
实验三十九 可溶性糖的测定(蒽酮比色法) 192
实验四十 谷物淀粉含量的测定(旋光法) 194
实验四十一 植物组织淀粉和纤维素含量的测定 197
第九章 脂类 200
实验四十二 粗脂肪的定量测定 200
实验四十三 油料种子油脂含量的快速测定(折光仪法) 202
实验四十四 卵黄中卵磷脂的提取和鉴定 205
实验四十五 油脂皂化值的测定 207
实验四十六 油脂碘值的测定 208
实验四十七 油脂酸值的测定 210
第十章 DNA 克隆与表达 212
实验四十八 DNA 的克隆 212
实验四十九 蛋白质表达 217
实验五十 表达产物检测 ——SDS-PAGE 220
第十一章 电子生物化学实验 224
实验五十一 DNA 序列下载与格式转换 224
实验五十二 真核生物基因结构的预测 226
实验五十三 蛋白质基本性质与功能分析 228
实验五十四 蛋白质系统发育树的构建 232
实验五十五 蛋白质相互作用预测 235
主要参考文献 237
附录一 实验室基本知识 238
附录二 硫酸铵饱和度计算表及相关参数 253