生物化学实验

第一篇 基本技能训练
第一章 实验室规则
一、学生实验守则
二、实验室安全防护知识
三、实验室灭火法
第二章 玻璃仪器的洗涤
一、生物化学实验常用玻璃仪器
二、实验室常用的洗涤溶液
三、常用玻璃仪器的洗涤
四、玻璃器皿的干燥
第三章 常用容量器的正确使用
一、吸管
二、微量移液器
三、容量瓶
四、滴定管
五、量筒
第四章 试剂的配制
一、溶液浓度的表示及配制
二、溶液浓度的调整
三、试剂配制中的注意事项
第五章 制备生命大分子物质的基本操作
一、实验材料的选择和处理
二、细胞的破碎
三、有效成分的提取
四、振荡与搅拌
五、离心
六、沉淀的过滤与洗涤
七、生命大分子物质的浓缩
八、生命大分子物质的冷冻干燥
第六章 实验误差和数据处理
一、实验误差
二、数据处理
第七章 实验记录、实验报告及考评方式
一、实验记录
二、实验报告
三、考核方式与评分方法
第二篇 生物化学实验
第八章 糖
实验一 硅胶G薄层层析法分离鉴定糖类
实验二 植物水溶性总糖的提取和含量测定（蒽酮比色法）
实验三 3，5-二硝基水杨酸比色定糖法
实验四 旋光法测定淀粉含量
第九章 脂
实验五 脂肪碘值的测定
实验六 磷硫铁法测定血清总胆固醇含量
实验七 粗脂肪的提取及含量的测定
实验八 蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定
实验九 卵磷脂的制备及气相色谱分析
第十章 氨基酸
实验十 甲醛滴定法测定氨基氮
实验十一 纸层析法分离鉴定氨基酸
实验十二 茶叶中茶多酚及氨基酸的提取和定量测定
第十一章 蛋白质
实验十三 蛋白质两性性质与等电点的测定
实验十四 蛋白质的沉淀、变性反应
实验十五 蛋白质含量的测定(双缩脲法）
实验十六 蛋白质含量的测定(Folin-酚法）
实验十七 蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法）
实验十八 牛乳中酪蛋白的提取及含量测定
实验十九 蛋白质含量的测定(微量凯氏定氮法）
实验二十 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳
实验二十一 蛋白质的透析技术
实验二十二 蛋白质的分级盐析及凝胶过滤法脱盐
实验二十三 大豆蛋白的提取、含量测定及氨基酸组成分析
实验二十四 鸡卵类黏蛋白的分离与纯化
实验二十五 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量
实验二十六 凝胶过滤层析法测定蛋白质相对分子质量
第十二章 核酸
实验二十七 动物肝脏DNA的提取
实验二十八 二苯胺定糖法测定DNA含量
实验二十九 定磷法测定RNA含量
实验三十 离子交换柱层析法分离核苷酸
第十三章 酶
实验三十一 酶的特异性
实验三十二 酶促反应动力学(pH、温度、激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响）
实验三十三 琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶
实验三十四 亲和层析法纯化胰蛋白酶
第十四章 维生素
实验三十五 荧光分光光度法测定维生素B2的含量
实验三十六 2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C含量
第十五章 新陈代谢
实验三十七 血液中葡萄糖的测定——邻甲苯胺法
实验三十八 肝糖原的提取、鉴定及定量测定
实验三十九 糖酵解中间产物的测定
实验四十 肌糖原的酵解作用
实验四十一 薄层层析法鉴定转氨酶的转氨基作用
实验四十二 细胞色素C的制备及测定
实验四十三 高效液相色谱法测定雌激素含量
附录
一、生物化学实验常用仪器的使用方法
(一）分光光度计
(二）离心机
(三）电泳仪
(四）PCR仪
(五）凝胶成像及分析系统
(六）恒温水浴锅
(七）酸度计
(八）恒温振荡培养箱
(九）旋转蒸发仪
(十）高效液相色谱仪
(十一）核酸蛋白检测分析系统
(十二）超净工作台
(十三）高压蒸汽灭菌锅
二、常用缓冲溶液的配制
(一）甘氨酸-盐酸缓冲液(0．05mol／L pH2．2～3．6，25℃）
(二）氯化钾-盐酸缓冲液(0．05mol／L，pH1．0～2．2，25℃）
(三）邻苯二甲酸氢钾-盐酸缓冲液(0．05 mol／L，pH2．2～4．0，20℃）
(四）醋酸-醋酸钠缓冲液(0．2mol／L，pH3．6～5．8，18℃）
(五）邻苯二甲酸氢钾一氢氧化钠缓冲液(pH4．1～5．9，25 ℃）
(六）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0．1mol／L，pH3．0～6．2）
(七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0．05 mol／L，pH5．8～8．0）
(八）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(pH2．6～7．6）
(九）磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0．2 mol／L，25℃）
(十）巴比妥钠-盐酸缓冲液(pH6．8～9．6，18℃）
(十一）Tris-盐酸缓冲液(O．05mol／L pH7～9，25℃）
(十二）硼酸-硼砂缓冲液(pH7．．～9．0）
(十三）碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0．1 mol／L，pH9．2～10．8）
(十四）甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0．05 mol／L，pH8．6～10．6，25℃）
(十五）硼砂缓冲液(pH8．1～10．7，25℃）
(十六）酸度计常用标准缓冲溶液的配制
三、层析法常用数据表
(一）凝胶过滤用相对分子质量标准品
(二）琼脂糖凝胶技术数据
(三）Sephadex G型交联葡聚糖凝胶的数据
(四）Sephadex G型交联葡聚糖凝胶溶胀所需时间
(五）聚丙烯酰胺凝胶技术数据
(六）离子交换层析介质的技术数据
(七）薄层层析分离各类物质常用的展层溶剂
四、硫酸铵饱和度常用表
(一）不同温度下饱和硫酸铵溶液的数据
(二）调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃）
(三）调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃）