PPARγ调控乳脂肪合成的研究

　　本书采用组织块培养法构建奶牛乳腺上皮细胞（DCMECs）模型。DCMECs添加乳脂肪合成前体物乙酸钠、β-羟基丁酸钠、乙酸钠和β-羟基丁酸钠混合物、软脂酸和硬脂酸，qRT-PCR检测DCMECs脂肪酸摄取、转运、活化相关蛋白基因、脂肪酸从头合成、去饱和酶基因、甘油三酯合成酶相关基因和乳脂肪合成转录调控因子相关基因的mRNA表达，Western blotting检测乳脂肪合成转录调控因子的蛋白表达，酶活性试剂盒检测甘油三酯合成酶活性变化，采用细胞免疫荧光法检测PPARγ的胞内定位情况。对DCMECs 的PPARγ进行基因沉寂和超表达，通过培养基中甘油三酯含量确定PPARγ基因沉寂和超表达的DCMECs对各脂肪酸的浓度需求变化，同时采用qRT-PCR、Western blotting和酶活性试剂盒检测各脂肪酸对PPARγ基因沉寂和超表达的DCMECs乳脂肪合成相关基因表达、转录调控因子蛋白表达及甘油三酯合成酶活性的影响。刘莉莉，黑龙江人，东北农业大学动物生物化学与分子生物学专业博士。2007年7月至今，工作于黑龙江中医药大学生物技术制药教研室，从事分子生物学、生物技术原理、生物技术制药、现代生物技术概论、药学生物技术概论、生物药物分离纯化等多门理论课程和实验课程的教学，有扎实的理论基础，并擅长分子生物学实验、动物细胞培养和基因的功能研究等。

　　本书采用组织块培养法构建奶牛乳腺上皮细胞（DCMECs）模型。DCMECs添加乳脂肪合成前体物乙酸钠、β-羟基丁酸钠、乙酸钠和β-羟基丁酸钠混合物、软脂酸和硬脂酸，qRT-PCR检测DCMECs脂肪酸摄取、转运、活化相关蛋白基因、脂肪酸从头合成、去饱和酶基因、甘油三酯合成酶相关基因和乳脂肪合成转录调控因子相关基因的mRNA表达，Western blotting检测乳脂肪合成转录调控因子的蛋白表达，酶活性试剂盒检测甘油三酯合成酶活性变化，采用细胞免疫荧光法检测PPARγ的胞内定位情况。对DCMECs 的PPARγ进行基因沉寂和超表达，通过培养基中甘油三酯含量确定PPARγ基因沉寂和超表达的DCMECs对各脂肪酸的浓度需求变化，同时采用qRT-PCR、Western blotting和酶活性试剂盒检测各脂肪酸对PPARγ基因沉寂和超表达的DCMECs乳脂肪合成相关基因表达、转录调控因子蛋白表达及甘油三酯合成酶活性的影响。刘莉莉，黑龙江人，东北农业大学动物生物化学与分子生物学专业博士。2007年7月至今，工作于黑龙江中医药大学生物技术制药教研室，从事分子生物学、生物技术原理、生物技术制药、现代生物技术概论、药学生物技术概论、生物药物分离纯化等多门理论课程和实验课程的教学，有扎实的理论基础，并擅长分子生物学实验、动物细胞培养和基因的功能研究等。