现代分子生物学实验原理与技术

序
前言
第一篇 基本操作篇
第一章 绪论
第一节 基因操作技术
第二节 实验室规则与安全
第二章 仪器操作与溶液配制
第一节 常用器皿与仪器
第二节 溶液
第三章 大肠杆菌培养与保存
第一节 培养前准备
第二节 大肠杆菌培养
第三节 大肠杆菌菌株保存
第四章 基因操作中的酶学反应
第一节 常用酶的选购与保存
第二节 限制性内切核酸酶
第三节 限制性内切核酸酶消化DNA实验
第四节 DNA作图
第五节 连接酶
第六节 其他核酸酶
第五章 电泳技术
第一节 基本原理
第二节 琼脂糖凝胶电泳
第三节 从琼脂糖凝胶中回收DNA
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第五节 从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA
第二篇 DNA篇
第六章 DNA基本操作
第一节 DNA保存
第二节 DNA检测
第三节 DNA浓缩
第四节 DNA纯化
第七章 扩增与提取质粒DNA
第一节 质粒有关基本知识
第二节 质粒DNA提取
第三节 质粒DNA纯化
第八章 DNA转化
第一节 制备感受态细胞
第二节 转化
第九章 扩增与提取噬菌体DNA
第一节 噬菌体生活史
第二节 感染力测定
第三节 噬菌体回收与繁殖
第四节 提取噬菌体DNA
第十章 提取真核生物基因组DNA 与构建基因组文库
第一节 SDS/酚法提取基因组DNA
第二节 试剂盒法提取基因组DNA
第三节 CTAB法提取基因组DNA
第四节 构建基因组DNA文库
第十一章 PCR基本操作
第一节 PCR基本原理
第二节 引物设计
第三节 耐热DNA聚合酶
第四节 PCR仪
第五节 PCR基本操作
第六节 PCR实例
第七节 预防污染
第八节 热启动
第十二章 DNA重组
第一节 重组流程
第二节 插入DNA的准备
第三节 载体的准备
第四节 连接
第五节 插入DNA的修饰与改造
第六节 转化
第七节 重组子筛选
第十三章 探针制备
第一节 探针标记法
第二节 随机引物法
第三节 末端标记法
第四节 探针纯化
第十四章 PCR产物克隆
第一节 PCR产物重组策略
第二节 PCR产物的纯化
第三节 末端平齐
第四节 TA克隆
第五节 添加限制性内切核酸酶识别序列
第十五章 PCR应用
第一节 菌落PCR
第二节 简并引物PCR
第十六章 Southern印迹
第一节 DNA酶切
第二节 琼脂糖凝胶电泳
第三节 变性、转膜与固定
第四节 杂交
第十七章 分子标记
第一节 微卫星标记
第二节 RFLP与RAPD
第十八章 DNA序列测定与比对
第一节 测序原理
第二节 自动测序仪
第三节 DNA序列的同源比对
第三篇 RNA篇
第十九章 RNA提取
第一节 RNA实验前的准备
第二节 实验材料
第三节 用AGPC法提取RNA
第四节 用NP-40法提取RNA
第五节 使用试剂盒提取RNA
第二十章 纯化poly(A)+ RNA
第一节 利用oligo(dT)纯化poly(A)+ mRNA
第二节 用oligo(dT)·纤维素进行柱层析
第二十一章 构建cDNA文库
第一节 以质粒为载体构建cDNA文库
第二节 以λ噬菌体为载体构建cDNA文库
第二十二章 RT-PCR
第二十三章 RACE
第一节 5'RACE
第二节 3'RACE
第二十四章 转录分析
第一节 Northern印迹
第二节 RNase保护分析
第四篇 表 达 篇
第二十五章 无细胞蛋白质合成
第一节 概述
第二节 大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统
第三节 小麦胚芽无细胞蛋白质合成系统
第二十六章 大肠杆菌表达系统
第一节 表达载体结构
第二节 表达中的问题
第三节 表达实例与SDS-PAGE检测
第二十七章 枯草杆菌表达系统
第一节 菌株与载体
第二节 转化
第三节 蛋白质的提取
第二十八章 放线菌表达系统
第一节 菌株与载体
第二节 放线菌培养
第三节 转化
第四节 蛋白质的提取
第二十九章 酿酒酵母表达系统
第一节 酿酒酵母表达系统概述
第二节 外源基因在酿酒酵母表达系统中的表达
第三十章 毕赤酵母表达系统
第一节 宿主
第二节 重组
第三节 重组基因的表达
第五篇 附 录
附录一 储液配制
附录二 核酸及蛋白质数据
附录三 各种识别位点的限制性内切核酸酶分类表
附录四 部分限制性内切核酸酶需要的保护碱基
附录五 筛选重组子用的平板标签贴纸(Φ=9cm)
附录六 常用DNA相对分子质量标准物的琼脂糖凝胶电泳图像示意图
附录七 本书作为教材的使用方法