大青杨抗逆基因工程育种

目录
前言
1　大青杨及其研究概述　1
1.1　青杨组织培养的研究概述　1
1.1.1　青杨基因资源　1
1.1.2　青杨组织培养研究进展　2
1.1.3　组织培养过程中的影响因素　3
1.2　杨树基因工程的研究　5
1.2.1　林木的遗传转化方法　5
1.2.2　杨树抗逆基因工程的研究进展　6
1.3 　大青杨抗逆分子基础研究的意义　7
参考文献　8
2　大青杨遗传转化体系的建立　11
2.1　大青杨组培体系的建立　11
2.1.1　外植体的选择和消毒　11
2.1.2　不定芽的诱导及增殖　11
2.2　遗传转化体系的建立　12
2.2.1　构建表达载体　12
2.2.2　根癌农杆菌介导法不同参数对转化效率的影响　13
2.3　转基因植株的筛选和分子检测　16
参考文献　18
3　大青杨PuHSFA4a响应高锌胁迫的机制研究　19
3.1　大青杨PuHSFA4a基因及其启动子的表达研究　19
3.1.1　实验材料　19
3.1.2　实验结果和分析　19
3.1.3　小结　24
3.2　大青杨PuHSFA4a基因的抗高锌功能研究　24
3.2.1　实验材料　24
3.2.2　实验结果和分析　24
3.2.3　小结　37
3.3　大青杨PuHSFA4a调控下游基因表达的分析　37
3.3.1　实验材料　37
3.3.2　实验结果和分析　38
3.3.3　小结　43
3.4　PuHSFA4a下游靶基因PuGSTU17和PuPLA2的鉴定　43
3.4.1　实验材料　43
3.4.2　实验结果和分析　43
3.4.3　小结　50
3.5　PuGSTU17和PuPLA2基因功能验证　51
3.5.1　实验材料　51
3.5.2　实验结果和分析　51
3.5.3　小结　64
参考文献　66
4　大青杨Pu-miR172d响应干旱胁迫的机制研究　69
4.1　小黑杨花芽发育相关miRNA的鉴定　69
4.1.1　实验材料　69
4.1.2　实验结果与分析　69
4.1.3　小结　82
4.2　大青杨Pu-miR172d在干旱胁迫下的功能研究　82
4.2.1　实验材料　82
4.2.2　实验结果与分析　82
4.2.3　小结　100
4.3　Pu-miR172d调控下游基因的分析鉴定　100
4.3.1　实验材料　100
4.3.2　实验结果与分析　101
4.3.3　小结　107
4.4　大青杨PuGTL1在干旱胁迫下的功能研究　108
4.4.1　实验材料　108
4.4.2　实验结果与分析　108
4.4.3　小结　121
参考文献　121
5　LbDREB6在大青杨中响应干旱和病原菌胁迫的机制研究　123
5.1　LbDREB6过表达对转基因杨树生长的影响　123
5.1.1　实验材料　123
5.1.2　实验结果　123
5.1.3　小结　126
5.2　不同表达水平的LbDREB6对大青杨抗旱性的影响及下游靶基因表达的比较　126
5.2.1　实验材料　126
5.2.2　实验结果　126
5.2.3　小结　129
5.3　不同表达水平LbDREB6对大青杨细菌病原体易感性的影响及转录组分析　131
5.3.1　实验材料　131
5.3.2　实验结果　131
5.3.3　小结　134
参考文献　135
6　大青杨PuHox52调控不定根形成的分子机制研究　136
6.1　茉莉素对杨树不定根形成的影响　136
6.1.1　实验材料　136
6.1.2　实验结果　136
6.1.3　小结　140
6.2　大青杨PuHox52基因及其启动子的研究　141
6.2.1　实验材料　141
6.2.2　实验结果　141
6.2.3　小结　150
6.3　PuHox52调控大青杨不定根形成的研究　151
6.3.1　实验材料　151
6.3.2　实验结果　151
6.3.3　小结　158
6.4　PuHox52调控不定根形成的下游基因鉴定分析　159
6.4.1　实验材料　159
6.4.2　实验结果　159
6.4.3　小结　164
6.5　PuHox52结合下游靶基因验证　168
6.5.1　实验材料　168
6.5.2　实验结果　168
6.5.3　小结　180
参考文献　182