植保生物技术（第二版）

目录
序
前言
第一章　植物保护与生物技术　1
第一节　植物保护学科的发现对生命科学的影响　1
一、发现烟草花叶病毒—病毒域的首*成员　2
二、发现马铃薯纺锤形块茎类病毒—类病毒域的首*成员　3
第二节　植物保护学科对生物技术的推动作用　4
一、对转基因育种的推动作用　4
二、对植物细胞工程的推动作用　6
三、对发酵工程的推动作用　6
第三节　生物技术在植物保护上的应用概况　10
一、组织培养技术的应用概况　10
二、转基因育种技术的应用概况　10
三、发酵技术的应用概况　11
四、分子生物学技术的应用概况　12
第二章　植物组织培养技术在植物保护上的应用　13
第一节　植物组织培养的基本原理、发展简史和一般程序　13
一、植物组织培养的基本原理及发展简史　13
二、植物组织培养的一般程序　13
第二节　植物抗病细胞突变体筛选　15
一、植物抗病细胞突变体筛选的基本原理　15
二、植物抗病细胞突变体筛选的一般程序　16
三、植物抗病细胞突变体筛选的实例　18
第三节　抗病虫细胞工程育种　23
一、抗病虫花培单倍体育种　23
二、抗病虫体细胞杂交育种　26
第四节　茎尖脱毒　31
一、茎尖脱毒的基本原理　31
二、茎尖脱毒的一般程序　32
三、茎尖脱毒的实例　35
第三章　基因工程技术在植物保护上的应用　46
第一节　基因工程的类别及技术原理　46
第二节　目的基因　47
一、目的基因的来源和种类　47
二、目的基因的获取　55
三、获取目的基因的实例　57
第三节　植物转化技术　58
一、重组DNA植物转化载体构建　59
二、用重组的植物转化载体转化根癌农杆菌　60
三、用含转化载体的根癌农杆菌转化植物　60
四、检验转基因植株及其后代　61
第四节　基因编辑技术在植物保护上的应用　62
一、基因编辑技术在病害防治中的应用　62
二、基因编辑技术在杂草防治及害虫防治中的应用　63
第四章　微生物发酵技术在植物保护上的应用　65
第一节　发酵技术的基本知识　65
一、发酵技术的内容　65
二、发酵技术的特点及应用　66
三、发酵设备　68
第二节　微生物发酵过程　69
一、基本过程　70
二、发酵的操作方式　72
三、发酵工艺控制　74
四、发酵过程中的检测　77
第三节　杀虫微生物的发酵生产　78
一、苏云金芽孢杆菌的选育和发酵生产　78
二、核型多角体昆虫病毒的鉴定、生产和加工技术　80
三、白僵菌和绿僵菌的选育和发酵生产　81
第四节　杀菌微生物的发酵生产　83
一、微生物抑制病原菌的作用机制　83
二、木霉菌的选育和发酵生产　85
三、抗病芽孢杆菌的选育和发酵生产　87
第五节　除草微生物的选育和发酵生产　88
一、真菌除草剂　89
二、细菌除草剂　91
三、放线菌除草剂　91
四、病毒除草剂　92
五、微生物除草剂的作用机制　92
六、微生物除草剂存在的问题和措施　96
第六节　产抗生素微生物的发酵生产　97
一、农用抗生素的类别　98
二、产抗生素微生物的筛选过程　98
三、产杀虫抗生素链霉菌的选育和发酵生产　99
四、产杀菌抗生素链霉菌的选育和发酵生产　103
第五章　分子检测技术在植物保护上的应用　105
第一节　蛋白质检测技术　106
一、酶联免疫吸附测定　106
二、免疫印迹法　110
第二节　核酸分子杂交检测技术　111
一、原理　111
二、核酸分子杂交中的探针　111
三、核酸分子的杂交方法　115
四、影响核酸分子杂交的因素　121
第三节　PCR技术　121
一、PCR的原理　122
二、PCR反应中的主要成分　122
三、PCR反应参数　126
四、PCR扩增产物的检测　128
五、PCR操作过程　129
六、PCR的特点　130
七、PCR的类型　130
第四节　实时荧光PCR技术　134
一、实时荧光PCR技术的原理　135
二、实时荧光PCR技术的种类　135
三、实时荧光PCR技术的特点　138
第五节　DNA分子标记　138
一、第一代分子标记　139
二、第二代分子标记　141
三、第三代分子标记　142
第六节　生物芯片技术　142
一、工作原理　143
二、生物芯片的分类　146
第七节　其他检验技术　148
一、连接酶链反应　148
二、依赖核酸序列扩增法　148
三、转录依赖的扩增系统　149
四、Qβ复制酶反应　149
五、环介导等温扩增法　149
六、重组酶聚合酶扩增技术　150
第八节　分子检测技术在有害生物鉴定中的应用　150
一、分子检测技术在植物病害诊断中的应用　150
二、分子检测技术在昆虫系统学研究中的应用　153
第六章　高通量测序技术在植物保护上的应用　155
第一节　高通量测序技术发展历史　155
一、第一代测序技术　155
二、第二代测序技术　157
三、第三代测序技术　158
第二节　高通量测序数据分析基本概念　160
一、几种高通量测序常用的应用场景　161
二、测序read及序列格式　162
三、其他常见的数据格式　164
四、其他相关专业术语　169
第三节　常见应用及生物信息分析流程　171
一、de novo基因组测序及分析　171
二、转录组测序及分析　178
第四节　高通量测序在植物病毒检测中的应用与实例分析　181
一、样品制备　181
二、文库构建　181
三、数据分析流程　182
主要参考文献　184